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PCR 社死现场大盘点!没有一个 tube 是无辜的......

人阅读 发布时间:2024-04-12 18:13

你的 PCR 是否偶尔也会出现「数据差、曲线一团糟」的情况,其实除了操作问题外,还有一个最容易被忽略的「BUG」——PCR 管。

想要 PCR 一次做成,避免 PCR 管带来的「尴尬情况」?首先要学会 PCR 管的选用,一款「高清、稳定、有数字、体积合适」的 PCR 管真的可以带你逃离社死现场。本文整理 3 个 tube 选择维度,带你挑选最适合的那个。
 

根据样本数量,选择 3 种 tube

01 少量样本如何选管?

首先可以考虑实验通量,根据样品数量选择耗材。少量样品的实验可以选择 PCR 单管、八联管或十二联管,减少耗材的消耗。

>>>PCR 单管: 独立管+独立盖子的组合,相对于 PCR 联管和 PCR 板更能确保样品的独立性,避免样品之间发生交叉污染,适合在样品量非常少的时候使用。

>>>PCR 联管: 常见的 PCR 联管有八联管和十二联管,在样品数量稍多一些的实验时,比 PCR 单管更具有操作的便捷性。出于避免样品污染或者方便 PCR 产物回收的考虑,可以选择每一个管子带独立盖子的 PCR 联管。

02 大量样本可选「孔板」

如果样品数量多,那么为了方便批量操作,可以根据样品数量挑选 24 孔、48 孔、96 孔或 384 孔的 PCR 板。在挑选 PCR 板的时候,需要额外考虑 PCR 板的切角和裙边设计。有了这两个「助手」,加样顺序就能一目了然,避免眼花缭乱。

>>>切角:一般用 PCR 板的数字字母组合定位,PCR 板上 8 个行常用大写英文字母表示,12 个列则用阿拉伯数字表示。故而切角位置在 A12 代表 96 孔 PCR 板的右上角位置有倒角设计。

>>>裙边:是在 PCR 孔口所在平面的基础上向上或向下延伸的垂直边缘。没有垂直边缘就是无裙边,垂直边缘向上延伸称为升裙边,垂直边缘向下延伸又可以分为两种情况——边缘向下延伸到底的称为全裙边,边缘向下延伸但不到板底的称为半裙边。
 

根据反应体系,选 tube 容量

其次,可以考虑反应体系大小进行选择。各类 PCR 耗材还有常规容量和低容量之分,对于样品珍贵稀少,或者所需反应体系较小的 PCR 实验可以用低容量的 PCR 耗材来降低样品和试剂的用量。


根据目的,选「凸盖」或「联盖」

还可以从实验目的出发考虑。普通 PCR 实验选择凸盖的 PCR 管或联盖,更有利于保持 PCR 耗材在实验过程中的形状稳定性,防止管口和孔口在经历剧烈温度变化时因为形变而导致样品蒸发。

qPCR 实验则一定需要选择平盖的 PCR 管或联盖以确保荧光透过率,必要时也可以选择用高透明度的封板膜进行批量密封。最后,白色孔的 PCR 耗材能够在更短时间内完成 qPCR 的荧光定量。


「神器」硬质框架 PCR 板,帮你更好地定位样本

PCR 实验已经是生物实验室的基础实验之一,小伙伴们日复一日配制的 PCR 体系充满了枯燥又辛苦的重复劳动。今天分享一款  PCR 「神器」,可以解决样本飞溅、忘记加样顺序、反应体系不稳定等问题——BRAND 硬质框架 PCR 板(点此详询)。它采用高硬度、高韧性的聚碳酸酯材质作外框,保证了 PCR 板在半自动和全自动移液系统中始终保持平整、稳定,从而协助提供更好的加样准确度和蒸发保护;采用 100% 纯医用级聚丙烯制成的超薄壁 PCR 孔,孔壁薄而均匀,确保温度从 PCR 仪到样品的快速均匀传递,从而缩短循环时间。

 

● 有半裙边和全裙边板可以选择,以适配不同的 PCR 仪型号

● 使用不同框架颜色的 PCR 板可以帮助区分不同的实验步骤

● 还有白色孔的 PCR 板可以选择,能够更好地反射荧光信号


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