师弟：师兄，我最近做的 Transwell ，上周污染，这周「穿」不过去！可怎么办呢？
师兄：其实这些问题很常见，增加细胞量，减少基质胶量，提高下室血清浓度就好。
师弟：其实这些问题很常见，增加细胞量，减少基质胶量，提高下室血清浓度就好。
师兄：那有可能是小室选错了，这也是很容易被忽略的第一步。师兄总结了 3 个维度，让你科学地选择适合自己的细胞小室。

第一步：选污染风险更低的小室

无论开展哪一种细胞体外培养实验，避免细胞受到污染都是首要的任务。在体外培养的过程中，细胞有可能受到多种渠道或者形式的污染，其中概率较高的是由于实验操作而引入的污染。

嵌套式培养细胞实验涉及的操作相对更为复杂。对嵌套式培养的细胞进行换液时、特别是对下层孔板的细胞进行换液时，如果可以减少冗余操作，则能够有效降低细胞因实验操作而受到污染的风险。

第二步：选择合适孔径的小室

细胞培养小室底部的径迹蚀刻膜通过蚀刻小孔实现通透性，并且设计不同的孔径以达到筛选可通透物的目的。每种孔径所支持的应用不尽相同，所以在选择细胞培养小室时，应该根据实验的需求挑选孔径适用的小室。

一种常用的挑选蚀刻膜孔径的规则是判断实验对小室内的细胞是否有穿过膜的需求，涉及细胞迁移、驱化能力的实验可以挑选孔径更大的小室。常见的蚀刻膜孔径和应用的适配性可以参考如下表格。
 

第三步：选择合适的蚀刻膜材质

除了孔径的区别以外，径迹蚀刻膜的最佳应用场景与膜本身的材质也有关系。常用于细胞培养小室径迹蚀刻膜的材质主要有聚碳酸酯（PC）和聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）。

● PC 膜多呈半透明，可能影响在使用过程中对下层孔板内细胞生长形态和密度的观察，但是 PC 膜被取下时不容易产生卷曲和撕裂，适合需要取下小室底膜对细胞进行染色等后续处理的实验。
● PET 膜的透明度更高，光学清晰度更好，不会阻碍使用人对细胞的观察。

按照以上 3 个步骤后，来到了最终决策阶段。本文为大家推荐一款「防污染、孔径种类多、两种蚀刻膜供选择」的「超能」细胞小室，为你的细胞保驾护航（点此查看详情）

BRAND Insert 2 in 1 细胞培养小室：

● 特殊的偏心设计留出足够的空间，更换下层孔板培养基时无需取出上层小室，从而降低污染风险。

● 通过挂钩搭配常规的 6 孔 / 12 孔 / 24 孔细胞培养板或培养皿使用。

● 经 cellGrade™ plus 表面处理的径迹蚀刻膜帮助细胞贴壁、生长，PET 膜的高透明度便于显微观察细胞状态，PC 膜的孔密度提供更好的通透性。

 

BRAND 细胞培养小室支持细胞染色结果

选择 0.4 μm 或 8.0 μm 孔径的 PC 膜 Insert 2 in 1 小室，通过站立式培养转换成悬挂式培养的方式建立气升式培养体系，体外建立 RhE 模型。细胞无需穿过径迹蚀刻膜，PC 材质膜便于固定染色。

在 Brand Insert 2 in 1 细胞培养小室培养的 RhE 模型苏木.精/曙红染色

实验结果显示，0.4 μm 的 PC 膜 Insert 2 in 1 细胞培养小室可支持正常人角质细胞向层状表皮分化。

 

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